上海千实解读《蛋白质纯化分析仪校准规范》-

　　上海千实精密机电科技有限公司：由全国生物计量技术委员会对口负责的《蛋白质纯化分析仪校准规范》征求意见稿已经起草完成。为了使国家计量技术规范能广泛适用和更具操作性，特向全国有关单位征求意见和建议。

　　蛋白质是生物体中广泛存在的一类生物大分子，由核酸编码的α-氨基酸之 间通过α-氨基和α-羧基形成的肽键连接而成的肽链，经翻译后加工而生成的 具有特定立体结构的、有活性的大分子。随着生命科学和生物技术的发展以及生 物产业的兴起，蛋白质纯化分析在临床检验、食品安全、医药等领域的应用与日 俱增，在新新领域如抗体生产，慢病毒，细胞治疗等领域也发挥着具体作用。蛋 白质纯度与大众健康紧密相连。许多重要的临床生化指标都离不开蛋白质的纯化 及纯度分析，并且临床检验仪器的检定和校准同样也离不开高纯度蛋白质标准物 质。

　　蛋白质纯化分析仪根据所要纯化的目的蛋白的特性，利用液相色谱结合不同 的色谱柱可以进行凝胶过滤、离子交换、疏水层析、反相层析和亲和层析，可用 于分离和纯化各种生物分子，包括天然蛋白质，重组和融合蛋白质、肽、寡核苷 酸、质粒、病毒、抗生素、生物碱等，可以检测、分离、纯化环境微生物、植物、 动物和人体中的多种生物分子。尤其适用于检测、纯化、分离制备蛋白质，包括 已知和未知蛋白质的纯化，蛋白药物的分离，病毒等生物颗粒的分离。显然蛋白 质纯化分析仪的性能将会影响到蛋白质检测、分离、纯化的终结果。同时蛋白 纯化过程中，对于 pH,电导，流速，压力等各方面参数的控制，对于蛋白纯化的 效率及蛋白的质量也起着至关重要的作用。

　　因此，为了保证分析结果的准确，有必要对蛋白质纯化分析仪的性能进行校 准和质量控制。由于是蛋白质纯化分析是近年来兴起的新新领域，目前国内外还 有没针对蛋白质纯化分析仪仪器的相关标准，只有针对于药物生产中对仪器自带分析软件的相关标准要求(如 FDA 的 21-CFR-part11)。国内也尚未出台有关蛋 白质纯化分析仪的检定规程或校准规范。随着蛋白质纯化分析仪的需求和数量随 着生物制药的兴起成指数级增长，对于仪器性能的要求也越来越高，如何确保其 结果的准确性和溯源性，从而确保产品质量的问题日益凸显。因此，对蛋白质纯 化分析仪的计量特性指标及其校准方法进行研究，并整理形成相关技术规范，对仪器性能进行校准和质量控制是十分必要和急迫的。

　　本规范依据国家计量技术规范 JJF1071-2010《国家计量校准规范编写规则》、JJF1001-2011《通用计量术语及定义》、JJF1059.1-2012《测量不确定度评 定与表示》编制。 本规范的制定主要参考了 JJG 705-2014 《液相色谱仪检定规程》及现行 蛋白质纯化分析仪相关技术文件。

　　依据国家计量技术规范 JJF1071-2010《国家计量校准规范编写规则》，本规程在架构上包括引言、范围、引用文献、术语和计量单位、概述、计量特性、 校准条件、校准项目和校准方法、校准结果、复校时间间隔表达10个部分。

　　校准环境条件：

　　1.环境温度(10～30)℃，相对湿度不大于 80%。2.室内应防潮、避光、防热、无腐蚀性物品，通风良好。

　　校准用的设备：

　　1.数字温度计：测量范围：(-10.0～100.0)℃，大允许误差±0.1℃。2.分析天平：大称量不小于100g，小分度值不大于1mg。

　　校准用的标准物质：

　　1.pH 标准物质：pH 测量范围(3～10)，不确定度应小于等于 0.01(k=2)。2.电导率标准物质：相对不确定度应小于或等于 0.25%(k=2)。3.紫外分光光度计溶液标准物质：参考波长为 235nm，257nm，313nm 和 350nm。4.蛋白质标准物质：使用纯品蛋白质标准物质，相对扩展不确定度小于等于 8%(k=2)。

　　校准结果处理：

　　经校准后的蛋白质纯化分析仪应填发校准证书，校准证书应符合 JJF 1071 -2010 中 5.12 的要求，并给出各校准项目名称和测量结果以及扩展不确定度。 校准原始记录格式见附录 A。

　　复校时间间隔：

　　建议蛋白质纯化分析仪复校准间隔一般不超过 1 年。由于复校时间间隔的 长短是由仪器的使用情况、使用者、仪器本身质量等诸因素所决定的，因此， 送校单位可根据实际使用情况自主决定复校时间间隔。如果在使用过程中对仪 器测量结果产生怀疑或更换主要部件应及时校准。

　　本规范适用于用于基于液相色谱技术的蛋白质纯化分析仪的计量性能的校准。