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缓冲盐不当使用对色谱柱影响-
在色谱分析过程中常常需要使用缓冲盐来调节流动相的pH值,缓冲盐的不当使用对色谱柱可能造成柱压升高、柱效下降以及使化合物的保留时间发生变化等影响:
1、柱压升高;
原因:
缓冲盐使用不当导致缓冲盐析出,堵塞塞板和键合相颗粒之间的孔隙,阻碍流动相质,引起柱压升高。
2、相同化合物的保留时间发生变化;
原因:
如果没有冲洗干净就进行进样,色谱柱内含有的盐会使化合物的保留时间发生变化。
3、柱效下降;
原因:
1)有些缓冲盐会渗入到键合相的深处,损害硅胶基体,导致色谱柱键合相流失,柱床变松,柱效下降;
2)凝结在键合相表面,使C18碳链难以舒展,对物质的保留能力下降,导致柱效降。
因此用过缓冲盐后需要对色谱柱进行冲洗,水中缓冲盐浓度较大时应特别引起注意。